Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
30 декабря 1999
года
Дата введения:
с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ N-АЦЕТИЛ-L-ГЛУТАМИНОВОЙ
КИСЛОТЫ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ
ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.881-99
Методические
указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии
"Научные основы гигиены труда и профпатологии".
Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации,
Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому
нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации
Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(сборник 36) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия
(ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Данная методика
контроля вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны.
Общие санитарно-гигиенические требования".
Методика
выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность
контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ
в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно
допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН
2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных
веществ в воздухе рабочей зоны".
HOOC-CH -CH -CH-COOH
2 2 |
NH-CO-CH М. м. 189,16
3
N-ацетил-L-глутаминовая кислота (АГК) - белый или почти белый
кристаллический порошок без запаха, с температурой плавления 193 - 198 °С.
Растворим в воде, умеренно растворим в спирте 95%, практически не растворим в
эфире.
В воздухе находится
в виде аэрозоля.
Обладает
общетоксическим действием.
ПДК в воздухе - 2,0
мг/куб. м.
Характеристика
метода
Метод основан на хроматографировании вещества в тонком слое на пластинках Силуфол с последующим обнаружением хроматограмм
раствором о-толидина и денситометрировании
окрашенных зон при длине волны 513 нм.
Отбор проб проводят
с концентрированием на фильтр.
Нижний предел
измерения содержания вещества в анализируемом объеме - 2,0 мкг.
Нижний предел
измерения вещества в воздухе - 1,0 мг/куб. м (при отборе 20,0 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций в воздухе от 1,0 до 10,0 мг/куб. м.
Определению не
мешают добезилат кальция, анестезин, аммиак.
Суммарная
погрешность измерения не превышает +/- 20%.
Время выполнения
измерения 2 часа, включая отбор проб.
Приборы,
аппаратура, посуда
Спектрофотометр Спекорд М-40 с приставкой для измерения отражения с
фотометрическим шаром, денситометр БИАН-170.
Аспирационное
устройство.
Фильтродержатели.
Хроматографическая камера для ТСХ размером 10 х 20 см, ГОСТ 23932-79Е.
Пластинки для
тонкослойной хроматографии Силуфол УФ 254,
<...>.
Хроматографическая камера для ТСХ, ГОСТ 23932-79.
Стаканы химические
вместимостью 50 мл, ГОСТ 19980-80.
Вакуумная
установка.
Колбы грушевидные
вместимостью 25 мл, ГОСТ 23932-79.
Колбы мерные
вместимостью 25 и 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Пипетки
вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Эксикатор с
пришлифованной крышкой, ГОСТ 6371-73.
Сушильный шкаф.
Реактивы,
растворы, материалы
N-Ацетил-L-глутаминовая кислота, фармакопейная.
Этиловый спирт,
ГОСТ 5963-67.
Бутиловый спирт,
ГОСТ 6006-78.
Кислота уксусная
ледяная, ГОСТ 61-75.
Кислота соляная, х.ч., ГОСТ 3118-77, 10% раствор.
Калий йодистый, ч.д.а., ГОСТ 4232-74.
О-толидин, ТУ 6-09-11-788-764.
Калий
марганцовокислый, ГОСТ 20490-77, х.ч., 1,5% раствор.
Калий йодистый,
ГОСТ 4232-74, ч.д.а.
Подвижный
растворитель: н-бутиловый спирт-ледяная уксусная
кислота-вода (40:15:10 мл).
Проявляющий
реактив
1. Получение паров
хлора. На дно эксикатора вместимостью 1,5 л наливают 50 мл 1,5% раствора калия
перманганата и 50 мл 10% раствора соляной кислоты и осторожно перемешивают.
Внутрь эксикатора кладут фарфоровую вкладку и закрывают пришлифованной крышкой.
Смесь готовят за 60 мин. до определения. Эксикатор должен находиться в вытяжном
шкафу.
2. Раствор о-толидина. 160 мг о-толидина
растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты, доводят объем до 500 мл
дистиллированной водой и добавляют 1,0 г йодистого калия. Хранят в посуде
темного стекла. Реактив устойчив в течение 2 недель.
Стандартный раствор
N 1 с концентрацией 500 мкг/мл готовят растворением 0,0500 г вещества в 40%
растворе этанола в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение
недели при хранении в холодильнике.
Стандартные
растворы с концентрацией 20-40-80-120-200 мкг/мл вещества готовят соответствующим
разбавлением 40% раствором этанола стандартного раствора N 1. Растворы
устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.
Фильтры АФА-ВП-10,
ТУ 95-743-80.
Отбор пробы
воздуха
Воздух с объемным
расходом 10 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10.
Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 20 л воздуха. Срок хранения проб 7
суток.
Подготовка
к измерению
Фильтр с отобранной
пробой переносят в химический стакан, <...> доводят 40% этанолом до 6 мл
и оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего
растворения вещества. Степень десорбции с фильтра - 95%. Полученный раствор
сливают в грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 60
- 70 °С. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл 40% этанола и используют полученный
раствор для анализа.
На линию старта
пластинки Силуфол (от края 1,5 см) наносят с помощью
микропипетки по 0,1 мл раствора пробы и стандартных растворов с концентрацией
от 20 до 200 мкг (размер пятна не должен превышать 0,5 см). Пластинку
высушивают на воздухе в течение 3 мин., помещают в камеру для хроматографирования с системой растворителей н-бутиловый спирт-ледяная уксусная кислота-вода (40:15:10 мл) и хроматографируют восходящим методом. После
того как фронт растворителя пройдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры и
подсушивают на воздухе 20 мин. Затем пластинку обрабатывают парами воды (держат
2 мин. над кипящей водяной баней) и переносят в камеру с парами хлора, где
выдерживают 20 мин. Для удаления паров хлора пластинку помещают под фен и
обрабатывают теплым воздухом 2 мин., затем орошают раствором о-толидина и высушивают феном (все операции
осуществляют только в вытяжном шкафу).
АГК проявляется
в виде темно-синего
пятна с величиной
R = 0,76 +/-
0,02. Окраска пятен устойчива
в течение суток.
f
Количественное
измерение содержания АГК в пробе проводят путем измерения пятен проб и
стандартов с помощью планиметра или денситометра.
Интенсивность
окраски пятен вещества измеряют на спектрофотометре Спекорд
М-40 с приставкой для отражения с фотометрическим шаром при длине волны 513 нм по отношению к фону. В качестве фона используется
участок исследуемой пластинки без вещества. Для каждой концентрации измеряют
отражение (Т) в %. Оптическая
плотность (Д) и отражение (Т) связаны между собой соотношением:
Д = -lg Т,
где Т - выражено в %, тогда:
I
Д = lg - х 100 или Д
= 2 - lg Т.
Т
По средним
результатам из пяти определений строят градуировочный
график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на
ось абсцисс - соответствующее им количество вещества в мкг в градуировочном растворе.
При использовании
планиметра количество вещества "М" (в мкг) в анализируемом объеме
пробы находят по формуле:
m х S
х
M = ------,
S
ст
где:
m -
содержание вещества на пятне стандарта, мкг;
S - площадь пятна пробы, кв. мм;
х
S - площадь пятна стандарта, кв. мм.
ст
При использовании
денситометра содержание вещества в анализируемом объеме находят по градуировочному графику.
Расчет
концентрации
Концентрацию АГК в
воздухе "С" (мг/куб. м) вычисляют по формуле:
а х в
С = --------,
б х V
где:
а - содержание
вещества, найденное по градуировочному графику, мкг;
в - общий объем
раствора пробы, мл;
б - объем раствора пробы, используемый для анализа, мл;
V - объем воздуха,
отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л
(см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С,
давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:
V (273 + 20) х Р
t
V = -------------------,
(273 + t°) х 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
Р - барометрическое
давление, кПа
(101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t° -
температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства
расчета V следует
пользоваться таблицей
коэффициентов
(Приложение 2). Для
приведения объема воздуха к
температуре
20 °С и к давлению 760 мм рт. ст. надо умножить
V на
t
соответствующий коэффициент.
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТ
К ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА
ВОЗДУХА К
СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
|
Т,
°С
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст.
|
|
97,33/
730
|
97,86/
734
|
98,4/
738
|
98,93/
742
|
99,46/
746
|
100/750
|
100,53/
754
|
101,06/
758
|
101,33/
760
|
101,86/
764
|
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2038
|
1,2122
|
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1400
|
1,1490
|
1,1551
|
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0635
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0357
|
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
1,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9878
|
0,9880
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9655
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9708
|
0,9734
|
0,9785
|
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9891
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9198
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|
Приложение
3
ВЕЩЕСТВА,
ОПРЕДЕЛЯЕМЫЕ ПО РАНЕЕ УТВЕРЖДЕННЫМ
МЕТОДИЧЕСКИМ
УКАЗАНИЯМ
┌─────────────────┬──────────────────────────────────────────────┐
│Название
вещества│
Опубликованные Методические указания
│
├─────────────────┼──────────────────────────────────────────────┤
│Тетрафторбромэтан│Методические указания на фотометрическое опре-│
│ │деление
фторорганических соединений в воздухе.│
│ │Сборник МУ, в. 1 - 5,
М., 1981, с. 187 │
├─────────────────┼──────────────────────────────────────────────┤
│Диметилкетазин
│Методические указания на фотометрическое │
│ │определение гидразина в
воздухе. │
│ │Сборник МУ, в. 1 - 5, М.,
1981, с. 108 │
├─────────────────┼──────────────────────────────────────────────┤
│Цианокобаламин
│Методические указания на фотометрическое
опре-│
│/витамин В / │деление кобальта и его соединений в
воздухе. │
│ 12
│Сборник МУ, в. 1 - 5, М., 1981, с. 14. │
│ │Методические указания
по измерению концентра- │
│ │ций
вредных веществ в воздухе рабочей зоны.
│
│ │Сборник МУ N 25, М.,
1989, с. 100 │
└─────────────────┴──────────────────────────────────────────────┘