Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
30 декабря 1999
года
Дата введения:
с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ ВЕРАПАМИЛА
[5(3,4-ДИМЕТОКСИФЕНИЛЭТИЛ)-МЕТИЛАМИНО-2(3,4-
ДИМЕТОКСИФЕНИЛ)-2-ИЗОПРОПИЛВАЛЕРОНИТРИЛ
ГИДРОХЛОРИД]
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.816-99
Методические
указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии
"Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым
заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем
Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию,
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в
декабре 1999 г.
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия
(ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методические
указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические
требования".
Методики
выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически
аттестованы и дают возможность контролировать концентрации химических веществ
на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН
2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в
воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные
уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
(Структурная формула
не приводится)
С Н N О , НСl М.м. 491,07
27 38 2 4
Верапамил -
кристаллическое вещество белого цвета, без запаха. Растворим в воде, этаноле,
хлороформе, не растворим в эфире.
Температура
плавления 142 - 143 °С. В воздухе находится в виде аэрозоля.
Верапамил обладает
чрезвычайно сильным раздражающим действием, оказывает влияние на зрение.
ОБУВ в воздухе -
0,2 мг/куб. м.
Характеристика
метода
Определение
основано на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с
применением спектрофотометрического детектора.
Отбор проб проводят
с концентрированием на фильтр.
Нижний предел
измерения - 0,008 мкг в анализируемой пробе раствора (1 мкл).
Нижний предел
измерения в воздухе - 0,1 мг/куб. м (при отборе 80 л воздуха).
Диапазон
определяемых концентраций - 0,1 - 1,25 мг/куб. м.
Суммарная
погрешность измерения не превышает +/- 23,5%.
Определению
верапамила не мешают бензол, толуол, ксилолы, кумол, анилин.
Длительность
анализа, включая отбор проб, 2 часа.
Реактивы,
растворы и материалы
Верапамил,
содержание основного вещества 99,5%.
Раствор верапамила
в дистиллированной воде, 1 мг/мл.
Этанол 96°, ГОСТ
5962-67.
Ацетонитрил для
жидкостной хроматографии, ОП-3, ос.ч., ТУ
6-09-14-2167-84.
Аммония ацетат,
х.ч., ГОСТ 3117-68.
0,1 М раствор
аммония ацетата (в 1 л дистиллированной воды растворяется 7,7083 г аммония
ацетата).
Элюент -
ацетонитрил: 0,1 М аммония ацетат (85:15).
Фильтры АФА-ВП-40,
ТУ 95.7181-76.
Приборы,
аппаратура и посуда
Хроматограф
жидкостный микроколоночный "Милихром" (ПО "Научприбор", г.
Орел).
Аппарат для
встряхивания пробирок АВ-30С, ТУ 61-1.24-51-78.
Аспирационное
устройство.
Испаритель
вакуумный ИР-1М, ТУ-25-11-917-76.
Пробирки ПГКШ-5,
ГОСТ 1770-74.
Пикнометр ПЖ
2-25-КШ 7/16, ГОСТ 22254-77Е.
Пипетки
вместимостью 1; 2; 5 мл, ГОСТ 20292-74 КЛО.
Фильтродержатель с
мембранным капроновым фильтром (25 мм; 0,2 мкм; МО КНПО
"Диагностикум").
Металлическая колонка 80 х 2 мм (заполнена сорбентом Силасорб
SРН С , 5 мкм).
18
Отбор пробы
воздуха
Воздух с объемным
расходом 5 л/мин. аспирирует через фильтр АФА-ВП-40, помещенный в
фильтродержателе (срок хранения отобранных проб в темном прохладном месте - до
5 дней). Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 80 л воздуха.
Подготовка
к измерению
Разбавлением
исходного стандартного раствора (1 мг/мл) готовятся градуировочные растворы с
концентрацией 8 - 100 мкг/мл.
Срок хранения
растворов в темном прохладном месте - 2 недели.
По 1 мкл каждого
градуировочного раствора вводят в хроматограф.
Калибровочный
график строится в координатах - по оси абсцисс - количество вещества в
анализируемой пробе (мкг), по оси ординат - площадь пика (кв. мм). Значения
площадей пиков определяются по 7 измерениям. Градуировочный график строят каждый
раз после приготовления новой серии градуировочных растворов и проверяют его
перед исследованием проб воздуха.
Условия
хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
Адсорбент:
Силасорб SPH С
(5 мкм).
18
Элюент: смесь 0,1 М
раствора аммония ацетата и ацетонитрила в соотношении 15:85.
Скорость подачи
элюента - 100 мкл/мин.
Длина волны
детекции - 278 нм.
Диапазон
чувствительности детектора - 0,4 А.
Чувствительность
шкалы электрометра - 50 мв.
Скорость движения
диаграммной ленты - 180 мм/час.
Время удерживания
верапамила - 3 мин. 32 сек.
Проведение
измерения
Фильтр с пробой
помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают 5 минут. Раствор
декантируют, фильтр еще два раза встряхивают с 3 мл этанола. Объединенный
спиртовой экстракт упаривают на вакуумном испарителе до 1 мл, фильтруют через
фильтр диаметром пор 0,2 мкм и исследуют на жидкостном хроматографе. 1 мкл
полученного раствора вводят в хроматограф аналогично градуировочным растворам.
Количественное
определение верапамила в хроматографируемом растворе проводят по предварительно
построенному градуировочному графику.
Расчет
концентрации
Концентрацию
вещества в воздухе С, мг/куб. м, рассчитывают по
формуле:
а х б
С = -----,
в х V
где:
а - содержание
вещества по калибровочному графику, мкг;
б - объем пробы, взятый для анализа, мл;
в - общий объем
пробы, мл;
V - объем воздуха,
отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям (л) (см. Приложение
1).
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и
давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:
V (273 + 20) х Р
t
V = ------------------,
20 (273 + t) х 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
Р - барометрическое давление,
кПа (101,33 кПа
= 760
мм рт. ст.);
t -
температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства
расчета V следует
пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха
к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТЫ
ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА
ВОЗДУХА К
СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
|
°С
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст.
|
|
97,33/
730
|
97,86/
734
|
98,4/
738
|
98,93/
742
|
99,46/
746
|
100/750
|
100,53/
754
|
101,06/
758
|
101,33/
760
|
101,86/
764
|
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2058
|
1,2122
|
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1460
|
1,1490
|
1,1551
|
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0535
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0557
|
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
1,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9878
|
0,9880
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9555
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9707
|
0,9734
|
0,9785
|
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9391
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9199
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|
|