Утверждаю
И.о. Председателя
Госкомсанэпиднадзора
России -
Заместитель
Главного
государственного
санитарного
врача Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
8 июня 1996 года
Дата введения -
с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ 6-МЕТИЛПИКОЛИНОВОЙ
КИСЛОТЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.245-96
1. Методические
указания по измерению концентрации вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(выпуск 30) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия
(ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
2. Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
утверждены и.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора
России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской
Федерации 8 июня 1996 г.
3. Введены впервые.
4. Методические
указания по контролю вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработаны и
подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88. ССБТ "Воздух
рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования", ГОСТа
12.1.016-79. ССБТ "Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения
концентраций вредных веществ" и ГОСТа Р 1.5-92,
п. 7.3.
Методические
указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта Федеральной
комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию
"Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение" и методбюро п/секции
"Промышленно-санитарная химия" Проблемной комиссии "Научные
основы гигиены труда и профпатологии".
Ответственные
исполнители: Г.А. Дьякова, С.И. Муравьева.
Исполнители: Г.А.
Дьякова, Н.С. Горячев, Л.Г. Макеева, Г.В. Муравьева, Е.М. Малинина, Е.В. Грыжина, Е.Н. Грицун.
Структурная формула
(не приводится).
C H
NO
М. м. 137,13
7 7 2
6-Метилпиколиновая кислота (МПК)
является полупродуктом в
синтезе метиоприла.
МПК представляет
собой белый кристаллический порошок, хорошо
растворим в воде, метаноле, ацетонитриле.
Т - 131 °С.
пл.
В воздухе МПК
находится в виде аэрозоля.
МПК оказывает
раздражающее действие на слизистую оболочку глаза, обладает сильным
кожно-резорбтивным действием.
ОБУВ в воздухе - 3
мг/куб. м.
Характеристика
метода
Определение МПК в
воздухе основано на предварительном концентрировании ее аэрозоля
на фильтре, экстракции метанольным раствором
гидроксида калия, превращении МПК в п-бромфенациловый
эфир и определении массовой концентрации полученного эфира методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) со спектрофотометрическим
детектированием.
Нижний предел
измерения в анализируемой пробе - 0,01 мкг; в воздухе - 1 мг/куб. м (при отборе
5 л воздуха).
Диапазон
определяемых концентраций МПК в воздухе составляет от 1 до 30 мг/куб. м.
Погрешность
определения +/- 22%.
Определению не
мешают 2,6-диметилпиридин, пиридин-2,6-дикарбоновая кислота.
Длительность
анализа, включая пробоотбор, - 3 ч.
Приборы,
аппаратура, посуда
Весы
аналитические типа ВЛА-200 или ВР-200
ГОСТ 24104-80Е
Меры
массы
ГОСТ 7328-82Е
Жидкостный
хроматограф "Милихром"
Колонка
аналитическая размером 250 х 4 мм,
упакованная сорбентом "Separon"
с размером
частиц
7 мкм или колонка подобного типа
Иономер универсальный типа ЭВ-74
с
погрешностью измерения не более 0,05 рН
(допускается применение рН-метров с
аналогичными
метрологическими характеристиками)
Аргон
в баллонах
Электроаспиратор ЭА-2С-М1 ТУ 2.840.016
Фильтры
АФА-ВП-20 с фильтродержателем ТУ 957181-76
Фильтродержатель с нейлоновым фильтром
с
диаметром пор 0,45 мкм (МО "Диагностикум")
Аппарат
для встряхивания пробирок АВ-30 С ТУ 64-1-2451-78
Колбы
мерные и пипетки
ГОСТ 1770-74Е
ГОСТ 20292-74Е
Посуда
стеклянная
ГОСТ 10394-72
ГОСТ 10515-75
Флаконы
с завинчивающейся крышкой или ампулы.
Реактивы,
растворы, материалы
Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72
Ацетонитрил, х.ч. (в качестве элюента ТУ 6-09-1092-83
используется
27,5%-ный водный раствор)
Метанол,
х.ч. ГОСТ
6995-77
Гидроксид
калия, ч.д.а. (используется СТ СЭВ
1489-78
0,036 М раствор в метаноле)
п-Бромфенацилбромид, ч.
(используется ТУ 6-09-3397-73
раствор
в ацетонитриле с концентрацией
3,5 мг/мл)
18-Краун-6, ч. (используется 1 мМ ТУ 6-09-05-946-79
раствор
в ацетонитриле)
6-Метилпиколиновая
кислота, содержание
основного
вещества - 99%.
Стандартный раствор
с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг вещества в 100 мл ацетонитрила, срок хранения - неделя.
Подготовка
к измерению
Непосредственно
перед приготовлением образцов МПК для анализа готовят рабочие растворы
гидроксида калия и 18-краун-6 путем разбавления их исходных растворов в 10 раз
метанолом и ацетонитрилом соответственно. Срок
хранения этих растворов - не более суток.
Разбавлением
основного раствора МПК ацетонитрилом готовят
калибровочные растворы с концентрациями 0,5; 1; 2; 3; 5; 8; 10 мкг/мл.
Образцы МПК для
анализа готовят следующим образом. Во флакон с завинчивающейся крышкой помещают
1 мл градуировочного раствора с необходимой концентрацией и растворитель удаляют в потоке аргона при
температуре 40 - 45 °С. К полученному остатку приливают 0,05 мл раствора
гидроксида калия, 0,25 мл метанола, закрывают крышкой и встряхивают. Затем
метанол удаляют в потоке аргона при температуре 40 - 45 °С. К полученному
остатку приливают 0,08 мл раствора п-бром-фенацилбромида;
0,01 мл раствора 18-краун-6; 0,25 мл ацетонитрила,
закрывают крышкой, встряхивают и выдерживают в водяной бане при 80 °С в течение 20 мин. Затем растворитель удаляют в потоке
аргона при температуре 40 - 45 °С. К полученному остатку приливают 1 мл ацетонитрила и фильтруют через нейлоновые фильтры.
Срок хранения
образцов - не более суток.
Условия хроматографирования стандартных растворов и анализируемых
проб:
подвижная фаза 27,5% водный
ацетонитрил;
скорость потока подвижной фазы 2 мл/мин.;
температура колонки 50 °С;
длина волны детектора 254 нм;
диапазон УФ-детектора 0,016 ед. опт.
пл.;
объем пробы 20 мкл;
время удерживания производного МПК 18 мин.
(п-бромфенациловый
эфир)
Измеряемым
параметром служит площадь хроматографического пика.
На основании
полученных данных строят калибровочный график в координатах: концентрация МПК в
растворе (мкг/мл) - площадь хроматографического пика
(кв. мм). Каждую точку получают на основании 5 измерений.
Градуировку
проводят не реже 1 раза в неделю.
Отбор пробы
воздуха
Воздух со скоростью
1 л/мин. аспирируют через фильтр, закрепленный в фильтродержателе.
Для определения 1/2
ОБУВ достаточно отобрать 5 л воздуха. Срок хранения отобранной пробы - 3 суток.
Проведение
анализа
Для определения
массовой концентрации МПК фильтр режут на мелкие кусочки, помещают во флакон на
3 мл, добавляют 0,2 мл раствора гидроксида калия и полностью заливают
метанолом. Затем крышку завинчивают и встряхивают 10 - 15 мин. Раствор
отбирают, помещают во флакон на 10 мл. Эту операцию повторяют 3 раза. Срок
хранения объединенного раствора не более суток.
Отбирают 1 мл
полученного раствора и анализируют, как описано в разделе
"Градуировка".
Если площадь пика
МПК более 20000, то пробу разбавляют до той концентрации раствора, площадь пика
которого лежит примерно в середине градуировочной
характеристики. Определение повторяют 5 раз и полученные значения усредняют.
Разброс данных при повторных измерениях не должен быть более 5%.
Расчет
концентрации
Массовую
концентрацию МПК (С) в воздухе рассчитывают по формуле:
а х б
С = --------,
V х 0,59
где:
а - количество МПК
по калибровочному графику, мкг/мл;
б - конечный объем экстракта МПК с фильтра, мл;
V - объем пробы
воздуха, приведенный к нормальным условиям, л (см.
Приложение 1).
0,59 - степень
извлечения МПК из фильтра.
Методические
указания разработаны НИИ медицины труда РАМН, институтом канцерогенеза, г.
Москва.
Приложение
1
ПРИВЕДЕНИЕ
ОБЪЕМА ВОЗДУХА К СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
(ТЕМПЕРАТУРА 20 °С И ДАВЛЕНИЕ 760 ММ РТ. СТ.)
Приведение объема
воздуха к стандартным условиям проводят по формуле:
V х (273 + 20) х Р
t
V = -------------------,
ст (273 + t°) х 760
где:
V - объем воздуха, отобранного для анализа, л;
t
Р - барометрическое давление,
мм рт. ст. (760 мм рт. ст. =
= 101,33 кПа);
t° -
температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства
расчета V следует
пользоваться таблицей
ст
коэффициентов
(Приложение 2). Для
приведения объема воздуха к
температуре
20 °С и
давлению 760 мм рт. ст. (101,33
кПа) надо
умножить V на
соответствующий коэффициент.
t
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТ
К ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА
ВОЗДУХА К
СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст.
|
|
°С
|
730
|
734
|
738
|
742
|
746
|
750
|
754
|
758
|
760
|
764
|
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2058
|
1,2122
|
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1400
|
1,1490
|
1,1551
|
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0535
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0557
|
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
1,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9778
|
0,9880
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9655
|
0,9605
|
0,9657
|
0,9708
|
0,9734
|
0,9785
|
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9891
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9198
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|