Утверждаю

Главный государственный

санитарный врач

Российской Федерации,

Первый заместитель

Министра здравоохранения

Российской Федерации

Г.Г.ОНИЩЕНКО

 

Дата введения -

1 января 2003 года

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

 

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ БРОМУКОНАЗОЛА В ВОЗДУХЕ

РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

МУК 4.1.1159-02

 

1. Методические указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

 

1. Вводная часть

 

Фирма-производитель: Авентис (Германия), РонПуленк (Франция).

Торговое название: ГРАНИТ, ВЕКТРА.

Действующее вещество: бромуконазол.

1-[(2RS,4RS:2RS,4RS)-4-бромо-2-(2,4-дихлорфенил)тетрагидрофурфурил]-1H-1,2,4-триазол (ИЮПАК).

Структурная формула (не приводится).

    C  H  BrCl N O                                     М. м. 377,1

     13 12    2 3

Изомерный состав: бромуконазол является смесью 2-х диастереоизомеров с кодовыми номерами - LS 850646 (изомер N 1) и LS 850647 (изомер N 2); типовое соотношение изомеров 54:46.

    Белый порошок без запаха.

    Температура плавления: 84 °C.

    Плотность при 20 °C: 1,72 кг/куб. м.

                                      -10

    Давление паров при 25 °C: 0,3 x 10    мм рт. ст.

Растворим в циклогексаноне (1320 мг), толуоле (480 мг), трибутилфосфате (420 мг), этаноле (178 мг), мало растворим в воде (50 мг). Растворимость приведена на 1000 мл при 20 °C.

Стабилен в водных растворах. Возможно хранение бромуконазола при комнатной температуре в течение года, при 35 °C - 6 месяцев, при 50 °C - 3 месяцев.

Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика

    Острая пероральная токсичность:

    ЛД   крысы - 365 мг/кг;

      50

    ЛД   мыши - 1151 мг/кг.

      50

    Острая дермальная токсичность:

    ЛД   крысы - более 2000 мг/кг.

      50

    Острая ингаляционная токсичность:

    ЛК   крысы - 5050 мг/куб. м.

      50

Бромуконазол отнесен к классу "не раздражающих кожу и глаза" препаратов.

Гигиенические нормативы

ОБУВ бромуконазола в воздухе рабочей зоны - 0,1 мг/куб. м;

ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,005 мг/куб. м.

Область применения препарата

Бромуконазол является новым стеролингибирующим системным фунгицидом с широким спектром действия, принадлежащим к семейству триазолов. Препарат предназначен для предупреждения грибковых заболеваний злаков, фруктов, винограда, овощных и тропических культур. Норма расхода препарата Вектра 10% с.к. - 0,3 л/га. Гранит 20% с.к. рекомендуется для применения на яровой и озимой пшенице с нормой расхода препарата 1,0 л/га.

Содержание действующего вещества в техническом препарате - 96%.

 

2. Методика измерения концентраций бромуконазола в воздухе

рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии

 

2.1. Основные положения

 

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении бромуконазола газожидкостной хроматографией с детектором постоянной скорости рекомбинации.

Отбор проб воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя лента".

Количественное определение каждого из изомеров бромуконазола проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания яблок, винограда, озимой и яровой пшеницы (хлор- и фосфорорганические пестициды, сим-триазины, фенилмочевины, тио- и дитиокарбаматы).

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (P = 0,95)

Число параллельных определений          10

Предел обнаружения в                    1 нг (0,5 нг для

хроматографируемом объеме               каждого изомера)

Предел обнаружения в пробе              0,05 мг/куб. м (при отборе

                                        20 л воздуха)

Диапазон определяемых концентраций      0,05 - 0,40 мг/куб. м

Среднее значение определения            92,25%

Стандартное отклонение (S)              6,52%

Относительное стандартное               2,06%

отклонение(DS)

Доверительный интервал среднего         4,67%

Суммарная погрешность измерения         не превышает 14%

 

2.2. Реактивы, растворы и материалы

 

Изомер бромуконазола N 1 (LS 850646) с

содержанием д.в. 99,7%

Изомер бромуконазола N 2 (LS 850647) с

содержанием д.в. 99,2%

Ацетон, осч                                           ГОСТ 2603-79

Хроматон-супер с 5% OV-225

(0,16 - 0,20 мм), Хемапол

Хроматон-супер с 5% OV-17 (0,16 - 0,20 мм), Хемапол

Бумажные фильтры "синяя лента",

предварительно промытые ацетоном

Азот, осч                                            ГОСТ 9293-74

 

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

 

Газовый хроматограф "Цвет" или аналогичный,

снабженный детектором постоянной скорости

рекомбинации (ДПР) с пределом детектирования

                 -14

по линдану 4 - 10    г/куб. см

Хроматографическая колонка стеклянная

длиной 1 м, внутренним диаметром 2 - 3 мм

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М            ТУ 25-11-917-74

или аналогичный

Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичный        ГОСТ 34104-80Е

Аспирационное устройство достаточной              ТУ 25-11-1414-78

разрешающей способности (типа ЭА-1)

Барометр-анероид М-67                             ТУ 2504-1797-75

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,             ГОСТ 215-73Е

цена деления 1 °C, пределы измерения 0 - 55 °C

Колбы мерные вместимостью 100 мл                  ГОСТ 1770-74

Цилиндры мерные вместимостью 10 мл                ГОСТ 1770-74Е

Колбы грушевидные со шлифом вместимостью 100 мл   ГОСТ 10394-72

Стаканы химические вместимостью 100 мл            ГОСТ 25336-82Е

Пипетки вместимостью 0,1 и 1 мл                   ГОСТ 20292-74

Фильтродержатель

Стеклянные палочки

 

2.4. Отбор проб

 

Отбор проб воздуха рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

В течение 15 мин. последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 5,0 куб. дм/мин. аспирируют в течение 5 мин. через фильтр "синяя лента". Для измерения 0,5 ОБУВ следует отобрать 20 л воздуха.

Фильтры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в холодильнике не более 10 дней.

 

2.5. Подготовка к определению

 

2.5.1. Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (5% OV-225 на Инертоне-супер) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250 °C в течение 10 - 12 часов.

2.5.2. Приготовление стандартных растворов

Готовят две серии стандартных растворов изомера N 1 и изомера N 2 бромуконазола.

Стандартный раствор каждого изомера (N 1 или N 2) с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г LS 850646 (LS 850647) в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 мкг/мл готовят из растворов, содержащих 100 мкг/мл изомера N 1 или изомера N 2, соответствующим разбавлением ацетоном. Растворы хранятся в холодильнике в течение 7 дней.

2.5.3. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика на определение одного из изомеров (изомера N 1 или N 2) в инжектор хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора LS 850646 (или LS 850647) с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0; 3,0 и 4,0 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят средние значения высот хроматографических пиков для каждой концентрации.

Строят 2 градуировочных графика (N 1 и N 2) зависимости высоты хроматографического пика в мм от содержания изомеров N 1 или N 2 в пробе в нг.

 

2.6. Описание определения

 

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 мл.

Далее объединенный экстракт упаривают в грушевидных колбах на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 45 °C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают током теплого воздуха. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и 1 мкл полученного раствора анализируют по п. 2.7.

 

2.7. Условия хроматографирования градуировочных

и анализируемых растворов

 

Хроматограф газовый "Цвет-550" с детектором постоянной скорости рекомбинации.

2.7.1. Неподвижная фаза - 5% OV-225 на Инертоне-супер (0,16 - 0,20 мм)

Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм

                                                   10

Рабочая шкала электрометра                 128 x 10   Ом

Скорость движения ленты самописца          240 мм/ч

Температура термостата колонки             220 °C

            детектора                      300 °C

            испарителя                     260 °C

Скорость газа-носителя (азот)              50 мл/мин.

Объем вводимой пробы                       1 мкл

Абсолютное время удерживания изомера N 1   7 мин. 58 с

                             изомера N 2   6 мин.

Линейный диапазон детектирования           0,5 - 4 нг (для каждого

                                           изомера)

Среднюю высоту пика вычисляют из результатов 3 последовательных вводов пробы в испаритель хроматографа. Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 4 мкг/мл, разбавляют ацетоном.

2.7.2. Альтернативная хроматографическая фаза

Неподвижная фаза 5% OV-17 на Инертоне-супер (0,16 - 0,20 мм)

Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм.

                                                  -10

Рабочая шкала электрометра                 128 x 10   Ом

Скорость движения ленты самописца          240 мм/ч

Температуры термостата колонки             250 °C

            детектора                      300 °C

            испарителя                     280 °C

Скорость газа-носителя (азота)             40 мл/мин.

Объем вводимой пробы                       1 мкл

Абсолютное время удерживания изомера N 1   4 мин. 45 с

                             изомера N 2   3 мин. 58 с

Линейный диапазон детектирования           0,5 - 2 нг (для каждого

                                           изомера)

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 2 мкг/мл, разбавляют ацетоном.

 

2.8. Обработка результатов анализа

 

    Содержание   бромуконазола   в  воздухе  рассчитывают  методом

абсолютной калибровки по формуле:

 

                             (A  + A ) B

                               1    2

                         С = -----------,

                                 b V

 

    где:

    C - содержание бромуконазола в воздухе, мг/куб. м;

    A   -  количество  изомера  N  1, найденное по градуировочному

     1

графику N 1, в анализируемом объеме пробы, нг;

    A   -  количество  изомера  N  2, найденное по градуировочному

     2

графику N 2, в анализируемом объеме пробы, нг;

    B - общий объем пробы для хроматографирования, мл;

    b - объем пробы, вводимый в хроматограф, мкл;

    V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного

к  стандартным   условиям  (давление  760  мм рт. ст., температура

20 °C), л.

 

                                  P

                     V = 0,386 ------- x u t,

                               273 + T

 

    где:

    T   -  температура  воздуха  при  отборе  пробы  (на  входе  в

аспиратор), °C;

    P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

    u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;

    t - длительность отбора пробы, мин.

 

3. Требования техники безопасности

 

Необходимо соблюдать требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР" (N 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации на приборы.

 

4. Разработчики

 

Ракитский В.Н., член-кор. РАМН, проф., Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Мошлакова Л.А., Ларькина М.В. Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (ФНЦГ им. Ф.Ф. Эрисмана).

г. Мытищи Московской обл., ул. Семашко, д. 2.

Телефон: (095) 586-12-76.