Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1987 г. N
4358-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
1-КАРБАМОИЛ-3(5)-МЕТИЛПИРАЗОЛА
И 3(5)-МЕТИЛПИРАЗОЛА В ВОЗДУХЕ ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ
ПРИСУТСТВИИ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая
характеристика препарата. 1-Карбамоил-3(5)-метилпиразол
(КМП) - ингибитор нитрофикации (см. с. 506, т. 1). В
воздухе может находиться в виде аэрозоля. В воздухе рабочей зоны ОБУВ КМП 0,5
мг/куб. м.
3(5)-Метилпиразол (МП) - продукт разложения КМП. Легколетуч,
давление пара при 25 °C 27 Па. В воздухе может находиться в виде паров и
аэрозоля. В воздухе рабочей зоны ОБУВ МП 0,5 мг/куб. м.
Принцип метода.
Определение основано на хроматографировании
анализируемых соединений в тонком слое пластинок "Силуфол"
с последующим обнаружением зон локализации препаратов путем обработки реактивом
Паули после предварительного облучения УФ-светом.
Отбор проб проводят с концентрированием (бумажный фильтр "синяя
лента", пенополиуретан эластичный).
Метрологическая
характеристика метода. Предел измерения в воздухе МП 0,04 мг/куб. м, КМП - 0,06
мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха). Предел определения в анализируемом объеме
пробы 1 мкг для МП и 1,5 мкг для КМП. Диапазон измеряемых концентраций МП 0,04
- 0,8 мг/куб. м, КМП - 0,06 - 0,8 мг/куб. м. Среднее значение процента
обнаружения 94,5. Доверительный интервал среднего результата при p = 0,95 и n =
5 равен +/- 1,95. Граница суммарной погрешности измерения +/- 17,45% для МП и
+/- 18,32% для КМП.
Избирательность
метода. Определению не мешают соединения, близкие по структуре и области
применения, такие как нитрапирин, 6-хлорпиколиновая
кислота, аминотриазол (АТГ).
Реактивы и
растворы. 1-Карбамоил-3(5)-метилпиразол х.ч. 3(5)-Метилпиразол х.ч. Хлороформ х.ч. Ацетон х.ч. н-Гексан х.ч.
Сульфаниловая кислота безводная ч.д.а. Гидроксид
калия х.ч., 10-процентный водный раствор. Гидроксид натрия х.ч., 15-процентный водный
раствор. Хлороводородная кислота х.ч.
концентрированная. Нитрит натрия х.ч., 10-процентный
водный раствор. Перманганат калия х.ч., 3-процентный
водный раствор. Йодид калия х.ч., 1-процентный водный
раствор. Крахмал растворимый х.ч., 3-процентный
водный раствор. Дистиллированная вода. Безводный сульфат натрия х.ч. Пенополиуретан (ППУ)
эластичный, бесцветный, очищенный ацетоном (12 ч) и хлороформом (36 - 48 ч в
аппарате Сокслета), кусочки размером 3 - 5 мм.
Фильтры бумажные обеззоленные "синяя
лента", предварительно промытые смесью хлороформ - ацетон - эфир (1:1:1) и
высушенные. Подвижная фаза гексан - ацетон (1:1);
альтернативная - хлороформ - ацетон (2:1). Стандартные растворы КМП и МП,
содержащие 10, 50, 100 мкг/мл.
Приборы, аппаратура, посуда.
Аспирационное устройство.
Фильтродержатели.
Ротационный вакуумный испаритель с набором колб.
Аппарат Сокслета. Поглотительные трубки гофрированные, стеклянные
длиной 7 - 10
см., наполненные 0,5 г ППУ (кусочки размером 3 - 5
мм). Воронки
лабораторные. Колбы: конические
на 50, 100 мл;
круглодонные
со шлифом на
100, 150 мл.
Пластинки
хроматографические "Силуфол" УФ
размером 15 x 15 см. Камера
254
хроматографическая. Камера
для хлорирования (эксикатор) на 2, 3 л.
Пульверизатор стеклянный. Ртутно-кварцевая лампа
ПРК-4 или ПРК-2.
Подготовка к
определению. Приготовление проявляющих реагентов. 1. Диазотированная
сульфаниловая кислота (реактив Паули). Сульфаниловую кислоту (5 г) растворяют в
25 мл 10-процентного раствора гидроксида калия. Охлажденный раствор смешивают с
25 мл 10-процентного раствора нитрата натрия. Этот раствор по каплям при
перемешивании прибавляют к охлажденной льдом хлороводородной
кислоте (40 мл хлороводородной кислоты + 20 мл
дистиллированной воды). Выпавший осадок отмывают на воронке Бюхнера
этиловым спиртом и сушат на фильтре. При хранении в темной склянке в
холодильнике соль устойчива 3 мес. Для опрыскивания пластин непосредственно
перед употреблением готовят 1,5-процентный раствор диазониевой
соли в 15-процентном растворе гидроксида натрия.
2.
N-галогенирование - йодкрахмальный реагент. Раствор для хлорирования. Смешивают
равные объемы 3-процентного раствора перманганата калия и 12-процентного
раствора хлороводородной кислоты, фильтруют через
бумажный фильтр, хранят в холодильнике. Смесь готовят непосредственно перед
употреблением. Проявляющий реагент а - 1-процентный раствор йодида калия; реагент б - 3-процентный раствор крахмала. Непосредственно
перед употреблением смешивают растворы а, б и этиловый
спирт в соотношении 2,5:2,5:1. Перед опрыскиванием пластинку на 3 - 5 мин.
помещают в эксикатор, содержащий раствор для хлорирования, после чего оставляют
на воздухе до удаления паров хлора (около 15 мин.) и обрабатывают проявляющим
реагентом.
Отбор проб воздуха.
Исследуемый воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют
через последовательно соединенные фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель, и 2 поглотительные трубки с ППУ. Для
определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 6 л воздуха. Пробы необходимо
анализировать сразу.
Ход анализа. Фильтр
помещают в коническую колбу и заливают 10 - 15 мл хлороформа, закрывают
притертой пробкой, встряхивают и оставляют на 30 мин. Из первой и второй
поглотительных трубок ППУ помещают в две разные колбы, приливают в каждую 25 мл
хлороформа, закрывают пробками и оставляют на 15 мин. при периодическом
встряхивании. Экстракт с фильтра и с ППУ обеих поглотительных трубок сливают в
колбу ротационного испарителя через слой безводного сульфата натрия. Фильтр и
ППУ дважды промывают 5 - 10 мл хлороформа, тщательно отжимая при этом. Объединенные
экстракты упаривают на ротационном испарителе при температуре бани не выше 30
°C до объема 0,1 - 0,2 мл. Остаток количественно наносят на хроматографическую
пластинку.
Условия хроматографирования. Справа и слева от пробы наносят
на
хроматографическую пластинку стандартные растворы КМП и МП (в
одну точку),
содержащие 1, 3, 5, 7 и 10 мкг соединений. Пластинку
помещают
в хроматографическую камеру
со смесью гексан - ацетон
(1:1).
После поднятия фронта
растворителя на 10 см пластинку
вынимают из камеры и оставляют на воздухе для
испарения подвижного
растворителя.
После этого пластинку
подвергают УФ-облучению в
течение
40 - 45
мин. и обрабатывают из
пульверизатора рабочим
раствором реактива Паули (на одну
пластинку расходуется 1,5 - 2 мл
реактива). Зоны локализации КМП и МП обнаруживаются
в виде красных
пятен на белом
фоне. Окраска пятен
МП устойчива в
течение
нескольких дней, а
КМП - 5 - 10 мин.
Величина R для
КМП -
f
0,8 +/- 0,02;
для МП - 0,5
+/- 0,02. Альтернативные условия
хроматографирования: подвижная
фаза хлороформ -
ацетон (2:1),
УФ-облучение в течение 45 мин. Затем пластинку
помещают в камеру с
хлорирующей
смесью на 3
- 5 мин. и
проявляют йодкрахмальным
реагентом.
Обработка
результатов анализа. Количество препарата в пробе определяют, сравнивая
интенсивность окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора. Линейность
детектирования соблюдается для КМП в интервале 1 - 20 мкг, а для МП - 0,5 - 20
мкг. Концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
G
X = ---,
V
20
где:
G -
количество препарата, найденное в анализируемом объеме
пробы, мкг;
V -
объем воздуха, отобранный для
анализа и приведенный к
20
стандартным условиям, л.
Требования техники
безопасности. Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в
химических лабораториях.