Утверждены

Минздравом СССР

24 августа 1983 г. N 2856-83

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ И ХРОМАТОСПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ

ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ БЕНОМИЛА И БМК В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

 

    Краткая    характеристика    препаратов.    Беномил   -  N-(1-

бутилкарбамоил-бензимидазолил-2)-О-метилкарбамат.   Брутто-формула

C  H  N O .   Молекулярная   масса   290,32.   Синоним  -  бенлат.

 13 18 4 3

Бесцветные   или   слегка   кремовые  кристаллы.  Т.  пл.  290  °C

(разлагается  у  точки  плавления).  Растворим  в  эфире, бензоле,

толуоле.  Практически нелетуч при комнатной температуре. В воздухе

может находиться в виде аэрозоля.

    БМК  -  N-(бензимидазолил-2)-О-метилкарбамат.   Брутто-формула

C H N O .   Молекулярная  масса  191,19.  Синоним  -  карбендазим.

 9 9 3 2

Кристаллическое    вещество    от    серого    или   голубого   до

темно-коричневого  цвета.  Т.  пл. 307 - 312 °C. Плохо растворим в

ацетоне,  хлористом метилене, хлороформе. Растворим в этилацетате,

диметилформамиде,  уксусной  кислоте. В воздухе может находиться в

виде аэрозоля. ОБУВ беномила и БМК в воздухе 1 мг/куб. м.

    Принцип   метода.   Метод   основан   на   хроматографировании

препаратов в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон

локализации:  беномила  -  по свечению  в УФ-свете на хроматоскопе

(254 нм); БМК - путем обработки смесью растворов и KMnO ; беномила

                                                       4

и БМК - путем измерения  светопоглощения  растворов препаратов при

длине волны 243 и 282 нм соответственно.

Отбор проб проводят с концентрированием (фильтр АФА-ВП).

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел измерения 3 мкг в анализируемом объеме раствора. Нижний предел измерения в воздухе 0,5 мг/куб. м (при отборе 6 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций 0,5 - 3,3 мг/куб. м.

Граница суммарной погрешности измерения +/- 14%.

Избирательность метода. Определению не мешают: ГХЦГ, ДДД, ДДТ, рогор, антио, базудин.

Реактивы, растворы, материалы. Беномил х.ч. БМК х.ч. Метиловый спирт х.ч., перегнанный, безводный (на 1 л метилового спирта добавляют 5 г магниевой стружки и после окончания реакции кипятят 2 - 3 ч с обратным холодильником, а затем метанол отгоняют). Бензол х.ч., перегнанный, безводный (обезвоживают азеотропной перегонкой и первые 10% дистиллята отбрасывают).

Спирт бутиловый нормальный ч.д.а. Уксусная кислота особой чистоты. Карбонат натрия, 5-процентный водный раствор. Перманганат калия х.ч., 1-процентный водный раствор.

Хроматографические пластинки "Силуфол" размером 150 x 150 мм. Силикагель марки КСК (фракция 0,16 мм), обработанный минеральными кислотами и проактивированный. Фильтры АФА-ВП-20. Подвижная фаза бензол - бутанол (9:1).

    Проявляющий  реагент:  смесь  равных   объемов   5-процентного

водного    раствора    Na CO   и  1-процентного  водного  раствора

                         2  3

перманганата калия. Реактив устойчив в течение суток.

Стандартный раствор беномила в метаноле концентрации 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг химически чистого беномила в сухом метаноле в мерной колбе на 100 мл. Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике в темной посуде.

Стандартный раствор БМК в уксусной кислоте концентрации 100 мкг/мл готовят растворением 100 мг БМК х.ч. в уксусной кислоте в мерной колбе на 100 мл. Раствор устойчив в течение 2 мес. при хранении в холодильнике.

Приборы, посуда. Аспирационное устройство. Фильтродержатели. Ротационный вакуумный испаритель. Колбы мерные на 10, 25, 50 и 100 мл. Баня водяная. Стеклянные пластинки для хроматографии размером 13 x 13 мм. Хроматографическая камера. Пульверизаторы стеклянные. Колбы с притертыми пробками. Пробирки с притертыми пробками. Туберкулиновые шприцы. Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл с ценой деления соответственно 0,01; 0,02; 0,05; 0,1 мл. Микропипетки вместимостью 0,2 мл с ценой деления 0,01 мл. Механический встряхиватель. Спектрофотометр СФ-16. Хроматоскоп (лямбда = 253,7 нм) ФМТ 377.

Приготовление пластинок для хроматографии с закрепленным слоем силикагеля КСК: стеклянные пластинки размером 13 x 13 мм тщательно промывают содой и дистиллированной водой, просушивают. Сорбент готовят смешиванием 0,5 г гипса, 20 г силикагеля и 60 мл дистиллированной воды в ступке. Пестиком растирают до однородной массы. На каждую пластинку наливают 1 - 2 чайные ложки, распределяют массу равномерным покачиванием. Сушат при комнатной температуре, хранят в эксикаторе.

Условия отбора проб воздуха. Исследуемый воздух протягивают через фильтры АФА-ВП-20 со скоростью 5 л/мин. Для определения 1/2 ОБУВ беномила и БМК следует отобрать 6 л воздуха. Срок хранения проб 2 сут.

Ход анализа. Определение беномила. Фильтр помещают в колбу с притертой пробкой, заливают 20 мл безводного метанола и проводят экстракцию в течение 30 мин. на механическом встряхивателе. Метанол сливают, а экстракцию фильтра повторяют еще дважды по 10 мл в течение 10 мин. Все экстракты объединяют, фильтруют, промывают фильтр 10 мл метанола и выпаривают до 0,2 мл на ротационном испарителе под вакуумом.

Остаток анализируют следующим образом:

    1. Раствор пробы количественно наносят  на  хроматографическую

пластинку  "Силуфол"  так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см.

Справа  и  слева  от  пробы  наносят стандартный раствор беномила,

содержащий  3,  5,  10,  20  мкг  препарата.  Пластинку помещают в

хроматографическую    камеру,    в   которую   за   10   мин.   до

хроматографирования  была  налита  подвижная фаза бензол - бутанол

(9:1). Край пластинки должен быть погружен в растворитель не более

чем  на 0,5 см. После поднятия фронта растворителя на высоту 14 см

пластинку  из  камеры  вынимают,  оставляют  на воздухе до полного

испарения  растворителей.  Затем  проявляют  на  хроматоскопе  при

лямбда = 253,7 нм. Беномил проявляется в виде пятен овальной формы

желтого  цвета  с  R   0,5  +/-  0,002. Количественное определение

                    f

проводят  визуально  по  интенсивности окрашивания и площади пятен

стандартных растворов и пробы.

2. Стеклянную хроматографическую пластинку делят по длине на 4 параллельные полосы. На первую и вторую полосу наносят в виде сплошной линии метанольный раствор пробы на беномил, стенки колбы ополаскивают небольшими порциями метанола и наносят туда же. На четвертую полосу наносят стандартный раствор беномила. Пластинку помещают в камеру, в которую за 20 - 30 мин. до хроматографирования наливают смесь растворителей бензол - бутанол (9:1). Когда фронт растворителей достигнет высоты 12 см, пластинку вынимают из камеры и после удаления следов растворителей закрывают первую, вторую и третью полосы пластинки темной бумагой, а четвертую полосу проявляют в УФ-свете, лямбда = 253,7 нм. По проявленной зоне отмечают участки силикагеля на первой и второй полосах, снимают участки с беномилом в колбу на 50 мл и элюируют 4 мл безводного метанола при встряхивании в течение 1 ч. Аналогичным образом элюируют и зону чистого силикагеля - третью полосу пластинки. Силикагель отфильтровывают и измеряют оптическую плотность элюата при 243 нм.

Количество беномила в растворе пробы определяют по градуировочному графику или путем сравнения оптических плотностей стандартного и испытуемого растворов. Для построения градуировочного графика в ряде мерных колб готовят стандартные растворы беномила хч концентрацией 1, 2, 5, 10, 15, 20 мкг/мл. Измеряют оптическую плотность растворов при 243 нм и строят градуировочный график зависимости оптической плотности раствора от концентрации беномила (мкг).

Определение БМК. Фильтр помещают в колбу с притертой пробкой, заливают 10 мл уксусной кислоты и проводят экстракцию в течение 30 мин. на механическом встряхивателе. Уксусную кислоту сливают и экстракцию с фильтра проводят еще дважды. Раствор объединяют, фильтруют, промывают фильтр 5 мл уксусной кислоты. Полученный раствор пробы анализируют двумя способами:

    1. Раствор пробы упаривают на ротационном вакуумном испарителе

до 0,2 мл. Остаток  количественно  наносят  на  хроматографическую

пластинку  "Силуфол"  так,  чтобы  диаметр  нанесенного  пятна  не

превышал 0,5 см. Слева и справа от пятна пробы наносят стандартный

раствор  БМК,  содержащий  3,  5,  10, 20 мкг препарата. Пластинку

помещают  в  хроматографическую  камеру,  в  которую за 10 мин. до

хроматографирования  была  налита  подвижная фаза бензол - бутанол

(9:1).  После  подъема  фронта  подвижной  фазы на 14 см пластинку

вынимают, оставляют на воздухе до полного испарения растворителей.

Затем   пластинку  обрабатывают  проявляющим  реагентом  -  смесью

растворов  Na CO  и KMnO . БМК проявляется в виде желтого пятна на

             2  3       4

розово-малиновом  фоне  с R  0,25 +/- 0,02. Количество БМК в пробе

                           f

оценивают по интенсивности окрашивания и площади пятен стандартных

растворов и пробы.

2. Раствор пробы на БМК упаривают на ротационном испарителе до объема 0,2 мл, остаток растворителя отдувают слабым током воздуха. Содержимое колбы после отгонки растворителя растворяют в безводном метиловом спирте.

Стеклянную хроматографическую пластинку делят по длине на 4 параллельные полосы. Дальнейшие процедуры проводят аналогично анализу N 2 раствора пробы на беномил. Оптическую плотность элюатов измеряют при 282 нм.

Обработка результатов анализа. Концентрацию препаратов в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

 

                                  G

                             X = ---,

                                 V

                                  20

 

    где:

    G  -  количество  препарата,  найденное в анализируемой пробе,

мкг;

    V   - объем воздуха, отобранный  для  анализа  и приведенный к

     20

стандартным условиям, л.

Требования безопасности. Соблюдать общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и пестицидами.