Утверждаю

Руководитель Федеральной

службы по надзору в сфере

защиты прав потребителей

и благополучия человека,

Главный государственный

санитарный врач

Российской Федерации

Г.Г.ОНИЩЕНКО

17 июля 2008 года

 

Дата введения:

1 сентября 2008 года

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

 

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ИЗОКСАДИФЕН-ЭТИЛА В ВОЗДУХЕ

РАБОЧЕЙ ЗОНЫ И СМЫВАХ С КОЖНЫХ ПОКРОВОВ ОПЕРАТОРОВ

МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

МУК 4.1.2406-08

 

1. Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 03.07.2008 N 2).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 17 июля 2008 г.

4. Введены в действие с 1 сентября 2008 г.

5. Введены впервые.

 

Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для измерения концентрации изоксадифен-этила в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов в диапазонах 0,05 - 0,5 мг/куб. м; 0,2 - 2,0 мкг/смыв, соответственно.

Этил-5,5-дифенил-2-изоксазолин-3-карбоксилат (ИЮПАК).

Структурная формула (не приводится).

    C  H  NO .

     18 17  3

    М.в. 295.

    Твердое вещество белого цвета со слабым запахом.  Температура плавления

                                      -6                       -6

86 - 87 °C.  Давление  паров  2,2 x 10   Па  (20 °C);  5,5 x 10    (25 °C);

        -5

1,3 x 10   (30 °C).  Растворимость в воде 1,06 мг/л (20 °C). Растворимость:

в  ацетоне  200 - 300 г/л,  н-гептане  3,7 г/л,   п-ксилене  120 - 150 г/л,

метаноле    25 - 30 г/л,    этилацетате    300 - 300 г/л.    Термически   и

гидролитически стабилен.

    Краткая токсикологическая характеристика:

    Острая  пероральная  токсичность (LD  ) для крыс (самки) - 1,611 мг/кг;

                                        50

(LD  ) для крыс (самцы) - 1,904 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD  )

   50                                                                   50

для крыс (самцы и самки) - > 2000 мг/кг.

Область применения:

Изоксадифен-этил является антидотом. Его действие проявляется через разложение форамсульфурона в точках роста чувствительных растений, т.е. в меристемных областях, где проходит деление и дифференциация клеток.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,7 мг/куб. м.

 

1. Погрешность измерений

 

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при доверительной вероятности 0,95.

 

2. Метод измерений

 

Измерения концентраций изоксадифен-этила выполняют методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором электронного захвата ионов (ЭЗД).

Концентрирование изоксадифен-этила из воздушной среды осуществляют на фильтр "синяя лента", экстракцию с фильтров проводят ацетоном, смыв с кожных покровов - этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,1 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 94,5%, с поверхности кожи - 93,58%.

 

3. Средства измерений, вспомогательные устройства,

реактивы и материалы

 

3.1. Средства измерений

 

    Газовый хроматограф "Кристалл-2000М", снабженный

электронозахватным детектором с пределом

                                -14

детектирования по линдану 5 x 10    г/с,

предназначенный для работы с капиллярной колонкой          Номер Госреестра

                                                           14516-95

    Весы аналитические ВЛА-200                             ГОСТ 24104

    Меры массы                                             ГОСТ 7328

    Микрошприц типа МШ-1М вместимостью 1 куб. мм           ТУ 2.833.105

    Аспиратор ПУ-4Э исп. 1 ЕВКН 4.471.023 (-01) РЭ         Номер Госреестра

                                                           14531-03

    Барометр-анероид М-67                                  ТУ 2504-1797-75

    Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления

1 °C, пределы измерения 0 - 55 °C                          ТУ 215-73Е

    Колбы мерные вместимостью 100 куб. см                  ГОСТ 1770

    Пипетки градуированные 2-го класса точности

вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 куб. см                   ГОСТ 29227

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

 

3.2. Реактивы

 

    Изоксадифен-этил, аналитический стандарт с содержанием

действующего вещества 99,3% (фирма "Байер Кроп Сайенс",

Германия)

    Азот особой чистоты, из баллона                        ГОСТ 9293

    Ацетон, ос.ч.                                          ГОСТ 2306

    Вода дистиллированная                                  ГОСТ 6790

    Натрий углекислый, х.ч.                                ГОСТ 83

    Спирт этиловый ректификованный                         ГОСТ Р 51652 или

                                                           ГОСТ 18300

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

 

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

 

    Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с                   ТУ 64-1-2851-78

    Баня водяная

    Бумажные фильтры "синяя лента", обеззоленные           ТУ 6-09-2678-77

    Бязь хлопчатобумажная белая

    Воронка Бюхнера                                        ГОСТ 9147

    Воронки конусные диаметром 40 - 45 мм                  ГОСТ 25336

    Груша резиновая

    Колба Бунзена                                          ГОСТ 25336

    Колбы грушевидные на шлифе вместимостью 150 куб. см    ГОСТ 9737

    Насос водоструйный                                     ГОСТ 25336

    Пинцет

    Стаканы химические с носиком вместимостью 150 куб. см  ГОСТ 25336

    Стекловата

    Стеклянные емкости вместимостью 100 куб. см

с герметичной металлической крышкой

    Стеклянные палочки

    Ректификационная колонна с числом теоретических

тарелок не менее 50

    Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi,

Швейцария

    Установка для перегонки растворителей

    Фильтродержатель

    Хроматографическая колонка капиллярная ZB-5

длиной 15 м, внутренним диаметром 0,5 мм, толщина

пленки сорбента 0,53 мкм

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

 

4. Требования безопасности

 

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны". Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

 

5. Требования к квалификации операторов

 

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией "лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.

 

6. Условия измерений

 

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °C и относительной влажности не более 80%;

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

 

7. Подготовка к выполнению измерений

 

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетона (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

 

7.1. Очистка ацетона

 

    Ацетон  перегоняют  над  небольшим   количеством  KMnO   и  прокаленным

                                                          4

карбонатом  калия  или  подвергают  ректификационной перегонке на колонне с

числом теоретических тарелок не менее 50.

 

7.2. Приготовление градуировочных растворов

и растворов внесения

 

7.2.1. Исходный раствор изоксадифен-этила для градуировки (концентрация 100 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 0,01 г изоксадифен-этила, растворяют в 50 - 60 куб. см ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °C в течение месяца.

7.2.2. Раствор N 1 изоксадифен-этила для градуировки (концентрация 10,00 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают 10,0 куб. см исходного раствора с концентрацией 100 мкг/куб. см (п. 7.2.1), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают раствор N 1 с концентрацией изоксадифен-этила 10,0 мкг/куб. см.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °C в течение 7-ми дней.

7.2.3. Рабочие растворы N 2 - 5 изоксадифен-этила для градуировки и внесения (концентрация 0,1 - 1,0 мкг/куб. см). В мерную колбу вместимостью 100 куб. см помещают по 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 куб. см раствора N 1 с концентрацией 10 мкг/куб. см (п. 7.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией изоксадифен-этила 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/куб. см.

Растворы N 2 - 5 хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °C в течение 7-ми дней.

Эти растворы изоксадифен-этила используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом "внесено-найдено".

 

7.3. Установление градуировочной характеристики

 

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ x сек.) от концентрации изоксадифен-этила в растворе (мкг/куб. см), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.

В испаритель хроматографа вводят по 1 куб. мм каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.3.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика действующего вещества.

Градуировочный график проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются более чем на 9% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

 

7.3.1. Условия хроматографирования

 

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Газовый хроматограф "Кристалл-2000М", снабженный электронозахватным детектором.

Колонка капиллярная ZB-5 длиной 15 м, внутренним диаметром 0,5 мм, толщина пленки сорбента 0,53 мкм.

    Температура детектора:  300 °C;

                испарителя: 260 °C.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 160 °C, выдержка 3 мин., нагрев колонки со скоростью 25 градусов в минуту до температуры 210 °C, выдержка 1 мин. 30 сек., нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту до температуры 260 °C, выдержка 1 мин. 30 сек.

Скорость газа 1 (азот): 30,0 см/сек., давление 13,232 кПа, поток 4,0895 куб. см/мин.

Газ 2: деление потока 1:3; сброс 12,26 куб. см/мин.

Хроматографируемый объем: 1 куб. мм.

Ориентировочное время выхода изоксадифен-этила: 5,46 мин.

Линейный диапазон детектирования: 0,1 - 1,0 нг.

 

7.4. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

 

Диаметр бумажного фильтра "синяя лента" должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетоном порциями 25 - 30 куб. см, сушат с помощью разрежения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

 

7.5. Подготовка салфеток для проведения смыва

 

Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 x 10 см, затем их последовательно обрабатывают 5%-ным раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

Для оценки квалификации растворителей применительно к задачам подготовки фильтров и салфеток проводят контроль чистоты по процедуре пробоподготовки и измерения, изложенных в пп. 10.1, 10.2 и 7.3.1.

 

8. Отбор и хранение проб воздуха

 

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны". Воздух с объемным расходом 2 - 4 куб. дм/мин. аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации изоксадифен-этила на уровне 0,07 ОБУВ (предел обнаружения) для воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 20 куб. дм воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре 4 - 6 °C - 7 дней.

 

9. Условия проведения смыва

 

Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, спина, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его для удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 кв. см). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 куб. см в стеклянную емкостью с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в морозильной камере при температуре -15 °C - 14 дней.

 

10. Выполнение измерений

 

10.1. Воздух рабочей зоны

 

Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 куб. см, заливают 10 куб. см ацетона, помещают на встряхиватель на 15 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 куб. см, выдерживая на встряхивателе по 10 минут.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 10 куб. см ацетона и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.3.1.

 

10.2. Смывы с кожных покровов

 

Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по 10 куб. см, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °C почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 2 куб. см ацетона и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.3.1.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию изоксадифен-этила в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/куб. см, разбавляют ацетоном (не более чем в 50 раз).

 

11. Обработка результатов анализа

 

11.1. Воздух рабочей зоны

 

Массовую концентрацию изоксадифен-этила в пробе воздуха (X), мг/куб. м, рассчитывают по формуле:

 

                              X = C x W / V ,

                                           t

 

    где:

    C - концентрация   изоксадифен-этила  в  хроматографируемом   растворе,

найденная по градуировочному  графику в соответствии  с  величиной  площади

хроматографического пика, мкг/куб. см;

    W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см;

    V  - объем  пробы  воздуха,  отобранный  для  анализа,   приведенный  к

     t

стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20° С), куб. дм.

 

                      V  = R x P x u x t / (273 + T),

                       t

 

    где:

    T - температура  воздуха  при  отборе  проб  (на  входе  в  аспиратор),

град. C;

    P - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

    u - расход воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;

    t - длительность отбора пробы, мин.;

    R - коэффициент, равный 0,386 для воздуха рабочей зоны.

    За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое результатов

                                           _

двух  параллельных  определений  X   и X  (X = (X  + X ) / 2),  расхождение

                                  1     2        1    2

между  которыми  не  превышает  значений  норматива  оперативного  контроля

сходимости (d):

 

                             |X  - X | <= d.

                               1    2

                                 _

                      d = d    x X / 100, мг/куб. м,

                           отн

 

    где:

    d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м;

    d    - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 11%).

     отн

 

11.2. Смывы с кожных покровов

 

Массовую концентрацию изоксадифен-этила в пробе смыва X, мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

 

X = C x W,

 

где:

C - концентрация изоксадифен-этила в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/куб. см;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, куб. см.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

 

12. Оформление результатов измерений

 

Результат количественного анализа представляют в виде:

                          _

    - результат  анализа  X  в мг/куб. м или мкг/смыв  (с указанием площади

смыва в кв. см),  характеристика погрешности дельта, % (+/- 25%),  P = 0,95

или

    _

    X +/- ДЕЛЬТА мг/куб. м (мкг/смыв, площадь смыва, кв. см), P = 0,95,

 

    где ДЕЛЬТА - абсолютная погрешность.

 

                                  _

                         дельта x X

                ДЕЛЬТА = ----------, мг/куб. м (мкг/смыв).

                            100

 

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание изоксадифен-этила в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,05 мг/куб. м; смыва - менее 0,2 мкг/смыв" <*>.

--------------------------------

<*> 0,05 мг/куб. м; 0,2 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 20 куб. дм воздуха рабочей зоны; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 кв. см), соответственно.

 

13. Контроль погрешности измерений

 

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

 

14. Разработчики

 

ФГУН "Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора".